SDS PAGE vs Eletroforese em Gel
A eletroforese pode ser utilizada para determinar a massa de um objeto, geralmente de proteína e ácido desoxirribonucléico (DNA). A fita de DNA, quando introduzida em produtos químicos, pode acelerar ou desacelerar o em formação processo. Marcadores de DNA de massa conhecida são usados para aproximar o tamanho dos objetos que viajam depois que a eletroforese termina. A eletroforese é provavelmente a ferramenta mais usada por biólogos moleculares e bioquímicos.
Existem dois tipos de eletroforese que são comumente usados neste processo. Estas são eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) e eletroforese em gel nativo.
SDS-PAGE é um método não seletivo de eletroforese em gel usado em campos como: bioquímica, forense, biologia e genética para separar proteínas de sua mobilidade eletroforética. SDS é um surfactante aniônico que pode ser usado para auxiliar na lise de células durante a extração de DNA e para separar proteínas em SDS-PAGE. Durante a eletroforese, uma mistura de proteínas é primeiro liquefeita em uma solução de SDS. Em seguida, uma substância chamada Mercaptoetanol é aplicada para remover o dissulfeto títulos para tornar a proteína linear. A eletroforese é então iniciada. Os resultados seria produz dois resíduos de moléculas, um dos quais é SDS-PAGE.
A ausência de SDS-PAGE não é um problema, pois a eletroforese em gel ainda pode ser feita apenas para que as proteínas não percam toda a sua estrutura secundária e terciária e não se abram em bastonetes geralmente retos.
Enquanto isso, a eletroforese em gel nativo usa o gel como meio anticonvectivo. É geralmente usado para separação de macromoléculas biológicas, como DNA, ácido ribonucleico (RNA) e proteína. Também pode ser usado para separação de nanopartículas.
Existem dois géis principais usados na eletroforese em gel nativo, a saber:
Gel de agarose que é usado para moléculas maiores. Este gel não identifica pequenas diferenças entre duas bandas moleculares. Ele também é usado exclusivamente para a separação de DNA. A visualização do gel de agarose é feita com a mistura de brometo de etídio.
Gel de poliacrilamida que é usado para moléculas menores. Este gel identifica as diferenças entre as bandas moleculares. Além do DNA, ele também pode separar proteínas.
Resumo:
1.SDS-PAGE é um método não seletivo de eletroforese em gel usado em áreas como: bioquímica, ciência forense, biologia e genética para separar proteínas de sua mobilidade eletroforética, enquanto a eletroforese em gel é geralmente usada para separação de macromoléculas biológicas, como DNA, ácido ribonucleico (RNA) e proteína. Também pode ser usado para separação de nanopartículas.
2. A eletroforese em gel nativo possui dois tipos, a saber: gel de agarose e gel de poliacrilamida.